fa افزایش بیان ژن آنزیم p-کومارات 3-هیدروکسیلاز و ترکیبات فنیل پروپانوئیدی تحت تاثیر کیتوزان در کشت سلولی گل میمونی سازویی (Scrophularia striata) بیوتکنولوژی biotechnology پژوهشي Research <p style="text-align: justify">کیتوزان از ترکیبات اصلی دیواره سلولی بسیاری از گونه های قارچی است که به عنوان الیسیتور زیستی در بهبود بیوسنتز متابولیت های ثانوی استفاده می شود. هدف از این مطالعه بررسی اثر کیتوزان بر رشد، تولید ترکیبات فنیل پروپانوئیدی ( فنل کل، پلی فنل اکیناکوزید، فلاونول کل و فلاونوئیدها) و بیان ژن آنزیم <em>p</em>-کومارات 3-هیدروکسیلاز (C3H) در طول دوره زمانی بعد از اعمال تیمار است. در این پژوهش، سلول ها با غلظت 10 میلی گرم در لیتر کیتوزان تیمار و در بازه زمانی 3، 5 و 7 روز پس از اعمال الیسیتور برداشت شدند. سنجش اکیناکوزید توسط کروماتوگرافی مایع با فشار بالا (HPLC) و اندازه گیری سایر ترکیبات فنیل پروپانوئیدی با روش اسپکتروفتومتری انجام شد و سطح بیان ژن نیز با روش Semi-quantitative RT-PCR بررسی شد. تیمار سلول های گل میمونی سازویی با کیتوزان سبب کاهش رشد سلولی و افزایش معنی داری در محتوای اکیناکوزید در تمامی روزهای بعد از اعمال تیمار نسبت به سلول های شاهد شد و میزان بیشینه اکیناکوزید 5 روز پس از اعمال تیمار حاصل شد (5.7 برابر شاهد). میزان فنل کل، فلاونول کل و فلاونوئیدها از ابتدا تا انتهای دوره زمانی، تحت تاثیر کیتوزان نسبت به سلول های &nbsp;شاهد افزایش یافت. بیان ژن آنزیم C3H، پس از افزودن کیتوزان القاء شد و اوج میزان آن پس از گذشت 5 روز از اعمال تیمار مشاهده گردید (2 برابر شاهد). کیتوزان با تاثیر بر بیان ژن آنزیم کلیدی مسیر بیوسنتزی ترکیبات فنیل پروپانوئیدی، سبب فرا تنظیمی تولید این ترکیبات از جمله اکیناکوزید می شود.</p> <p>Chitosan is the main compounds of fungal species cell walls and as biotic elicitors could be used to improve secondary metabolites. In this study, we have verified the time-course of cell growth, phenylpropanoid compounds ( total phenol, flavonols, flavonoids and echinacoside) production in cells treated with chitosan. To study mechanism of chitosan action, expression of<em> p-coumarate 3-hydroxylase (C3H)</em> gene was investigated. The cells were treated with 10 mg/L chitosan. Cells were harvested for 3,5 and 7 days after elicitation. Echinacoside quantified by high-performance liquid chromatography (HPLC) and other phenylpropanoid compounds were measured with spectrophotometric assay. Cells samples were used to elucidate the expression level of <em>C3H</em> gene by Semi-quantitative RT-PCR. Following treatments with chitosan, the results showed that the cell growth and viability of cells were decreased as compared to control. In addition, chitosan increased total phenol, flavonoids and flavonols. Cells elicited with chitosan for 5 days yielded the highest amount of echinacoside wich was about 5.7-fold higher than control. The expression of gene by chitosan was increased, reaching a peak at 5 day after treatment (2-fold higher than control). Chitosan up-regulate the production of phenylpropanoid compounds and derivates such as echinacoside, by effecting on gene expression of this compounds biosynthesis pathway.</p> اکیناکوزید, بیان ژن, کیتوزان, گل میمونی سازویی Chitosan, Echinacoside, Gene expression, Scrophularia striata Boiss 81 90 http://jispp.iut.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-735-1&slc_lang=fa&sid=1 maryam kamalipourazad مریم کمالی پورآزاد mkamalipourazad@yahoo.com No Tarbiat Modares University دانشگاه تربیت مدرس mohsen sharifi محسن شریفی p2azad@yahoo.com Yes Tarbiat Modares University دانشگاه تربیت مدرس Hassan Zare maivan حسن زارع مایوان zaremaih@modares.ac.ir No Tarbiat Modares University دانشگاه تربیت مدرس mehrdad behmanesh مهرداد بهمنش behmanesh@modares.ac.ir No Tarbiat Modares University دانشگاه تربیت مدرس Najmeh Ahmadian Chashmi نجمه احمدیان چاشمی n.ahmadian@umz.ac.ir No University of Mazandaran دانشگاه مازندران