Plant Process and Function

fa تأثیر ترکیبات محیط‌کشت بر رشد و تولید آزادیراختین در کشت سوسپانسیون سلولی چریش (Azadirachta indica) The effect of medium compounds on growth and azadirachtin production in cell suspension culture of neem (Azadirachta indica) بیوتکنولوژی biotechnology پژوهشي Research آزادیراختین یکی از مهمترین متابولیت ثانویه چریش است که بهعنوان آفتکش طبیعی استفاده میشود. در این مطالعه تأثیر غلظتهای مختلف ساکارز (1، 2، 3، 4 و 5 درصد)، کلسیم کلرید، مونوپتاسیم فسفات، پتاسیم نیترات، منیزیم سولفات ونیترات آمونیوم  (غلظتهای x5/0، x1، x5/1، x2 و x5/2 محیطکشت MS پایه) روی رشد سوسپانسیون سلولی چریش و تولید آزادیراختین مورد بررسی قرار گرفت. اگر چه بین تعدادی از غلظتهای تیمارهای اعمالشده اختلاف آماری معنیداری از نظر شاخصهای مورد مطالعه وجود نداشت اما بیشترین مقدار وزن تر و خشک با کاربرد 3 درصد ساکارز، x1 کلسیم کلرید، x1 منیزیم سولفات و x1نیترات آمونیوم  (02/493 و 27/77 گرم در لیتر)، x5/2 مونوپتاسیم فسفات (97/500 و 77/80 گرم در لیتر) و x5/0 پتاسیم نیترات (01/495 و 41/78 گرم در لیتر) حاصل شد. بالاترین حجم سلولهای ساکن با کاربرد 4 درصد ساکارز (69/95 درصد)، x1 کلسیم کلرید و x1نیترات آمونیوم  (93/94 درصد)، x5/2 مونوپتاسیم فسفات (22/97 درصد)، x5/0 پتاسیم نیترات (96/94 درصد) و x2 منیزیم سولفات (96/94 درصد) بهدست آمد. حداکثر مقدار تجمع آزادیراختین با کاربرد 4 درصد ساکارز (72/3 میلیگرم در گرم وزن خشک)، x5/0 کلسیم کلرید (80/3 میلیگرم در گرم وزن خشک)، x5/0 مونوپتاسیم فسفات (73/3 میلیگرم در گرم وزن خشک)، x1 و x5/1 پتاسیم نیترات (69/3 میلیگرم در گرم وزن خشک)، x1 منیزیم سولفات (69/3 میلیگرم در گرم وزن خشک) و x5/1نیترات آمونیوم  (71/3 میلیگرم در گرم وزن خشک) مشاهده گردید. بیشترین مقدار تولید آزادیراختین نیز با مقدار 65/286 میلیگرم در لیتر در محیطکشت MS پایه حاوی 3 درصد ساکارز حاصل شد. Azadirachtin is an important secondary metabolite of neem which is used as a natural biopesticide. In this study the effect of different concentrations of sucrose (1, 2, 3, 4 and 5%), calcium chloride, monopotassium phosphate, potassium nitrate, magnesium sulfate and ammonium nitrate (0.5x, 1x, 1.5x, 2x and 2.5x concentrations of MS base medium) on neem cell suspension growth and azadirachtin production was investigated. Although there were no significant difference between some of the treatment in terms of studied indices, the highest amount of fresh and dry cells weight were obtained by using 3% sucrose, 1x calcium chloride, 1x magnesium sulfate and 1x ammonium nitrate (493.02 and 77.27 g/L), 2.5x monopotassium phosphate (500.97 and 80.77 g/L) and 0.5x potassium nitrate (495.01 and 78.41 g/L). The highest settled cell volume was obtained by application of 4% sucrose (59.69%), 1x calcium chloride and 1x ammonium nitrate (94.93%), 2.5x monopotassium phosphate (97.22%), 0.5x potassium nitrate (94.96%) and 2x magnesium sulfate (94.96%). Maximum amount of azadirachtin accumulation observed by using 4% sucrose (3.72 mg/g DW), 0.5x calcium chloride (3.80 mg/g DW), 0.5x monopotassium phosphate (3.73 mg/g DW), 1x and 1.5x potassium nitrate (3.69 mg/g DW), 1x magnesium sulfate (3.69 mg/g DW) and 1.5x ammonium nitrate (3.71 mg/g DW). The highest amount of azadirachtin production was 286.65 mg/L obtained in MS basal medium supplemented with 3% sucrose.  آزادیراختین, چریش, ساکارز, سوسپانسیون سلولی, عناصر درشت مغذی Azadirachtin, Cell suspension, Macronutrients, Neem, Sucerose 153 170 http://jispp.iut.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-622-2&slc_lang=fa&sid=1 Reza Farjaminezhad رضا فرجامی نژاد reza.farjaminezhad@gmail.com No Department of Biotechnology, Faculty of Agriculture and Natural Resources, Imam Khomeini International University, Qazvin, Iran گروه بیوتکنولوژی، دانشکده کشاورزی و منابع طبیعی، دانشگاه بین المللی امام خمینی (ره)، قزوین Ghasem-ali Garoosi قاسمعلی گروسی agaroosi90@yahoo.com Yes Department of Biotechnology, Faculty of Agriculture and Natural Resources, Imam Khomeini International University, Qazvin, Iran گروه بیوتکنولوژی، دانشکده کشاورزی و منابع طبیعی، دانشگاه بین المللی امام خمینی (ره)، قزوین